技术介绍
将体系里的 Cas9 突变成 dCas9(dead Cas9),它没有切割 DNA 活性。在目标基因启动子区域或者增强子区设计 sgRNA,引导 dCas9 蛋白靶向结合该基因的启动子区域的 DNA。则该位置被 dCas9“占据”,基因转录被抑制。还可将转录抑制肽 KRAB repressor 融合的 dCas9 蛋白的 C 端,使转录抑制更强化。
技术原理
CRISPRi 原理
CRISPRi 高效敲降(效率为 90% 以上)。由伯豪生物实验室完成。
伯豪优势
快速高效、操作简便:只需设计 sgRNA,整个实验周期一般需 45-60 个工作日(以 293T 细胞为参照)。
定向精准:由 RNA 指导的 Cas9 核酸酶进行靶向剪切,大大降低基因编辑中脱靶发生率。
应用广泛:可构建 mRNA 和非编码 RNA(lncRNA,miRNA, ceRNA)的删除、低表达或高表达细胞模型。
灵活多变:拥有上下游配套研究工具,如高通量测序、芯片、qPCR、基因功能预测等。通过与 CRISPR 技术进行不同组合,帮助研究者实现多样研究目的。
全程一站:只需提供样本,可提供从高通量技术出发到基因功能研究的全套技术研究方案。
项目流程
样本要求
客户提供基因信息,疾病信息,活细胞或细胞类型、培养条件信息。
公司提供细胞稳定株,及实验报告(材料、试剂、仪器、方法、实验结果)。
案例展示
经典文献
Xing YH, Yao RW, Zhang Y, Guo CJ, Jiang S, Xu G, Dong R, Yang L, Chen LL. SLERT Regulates DDX21 Rings Associated with Pol I Transcription. Cell. 2017 May 4;169(4):664-678.e16.
Yi Zheng et al. CRISPR interference-based specific and efficient gene inactivation in the brain. Nature Nueroscience. 2018.
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