伯优 ® Bescript Probe One Step RT-qPCR Kit 是一种一步法反转录定量扩增的 qPCR 预混试剂盒,由反转录酶、RNA 酶抑制剂、BesTaq DNA 热启动酶、dNTPs、Mg2+ 以及相关缓冲液组成。使用本产品进行 RT-qPCR 反应,只需在此基础上再加入引物、探针、模板和灭菌 DEPC 水即可。
1、特异性高:采用热启动酶可抑制非特异性反应,并保证多重反应的灵敏性。
2、灵敏度好:对 HCV RNA 检测灵敏度为:20 IU/mL。
3、使用方便:RT 和 qPCR 在同一管中连续进行,快速简便、无污染。
4、通用性好:兼容所有的荧光 PCR 仪。
储存条件
-20℃保存 12 个月,使用前充分溶解混匀。
短期使用可放 4℃保存,避免反复冻融。
注意事项
1. 本制品不含内参 ROX 染料。
2. 请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法
1. 反应液配制
反应液 成分 | 体积 | 终浓度 |
One Step Probe Mix | 10μl | 1× |
One Step Enzyme Mix | 5μl | 1× |
正向引物(10μM) | 0.5μl | 200nM |
反向引物(10μM) | 0.5μl | 200nM |
探针(10μM) | 0.25μl | 100nM |
模板 | 1-5μl | |
总计 | 补 ddH2 O 至 25μl |
2. PCR 循环条件的设定
步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 | |
1 | 反转录 | 50℃ | 20min | 1 cycle |
2 | 预变性 | 95℃ | 5min | 1 cycle |
3 | 变性 | 95℃ | 10s | 40 cycles |
4 | 退火、延伸 | 60℃ | 45s | |
步骤 4 收集荧光信号 |
3. 实验结果分析
根据扩增曲线的结果进行荧光定量 PCR 数据分析。
货号 | 产品 | 规格 |
21606 | 伯优 ® Bescript Probe One Step RT-qPCR Kit | 100rxns |
500rxns |