同重同位素标记的相对和 jué对定量(isobaric tags for relative and absolute quantitation,iTRAQ)技术由 AB SCIEX 于 2004 年研发推出的一种多肽体外标记技术。
iTRAQ 标记试剂共有 8 种标记,每种标记都包含报告基团、质量平衡基团和多肽反应基团,它们的分子量之和相等,因此不同标记的样本中的同一肽段表现为相同的质荷比。在经过二级质谱时,质量平衡基团丢失,而报告基团在二级质谱低质量区产生不同的报告离子,根据报告离子的信号强度值可获得样品间相同肽段的定量信息。目前 iTRAQ 可同时比较多达 8 组样品的蛋白质表达差异。而由 Thermo Fisher 推出的同款原理相同的产品 TMT(Tandem Mass Tag)可同时标记分析 10 个样品。
iTRAQ 标记试剂结构
1、灵敏度高:可以检测出低丰度蛋白;
2、通量高:同时对 8 个(TMT10 个)样本进行分析;
3、结果可靠:通过一批次上机,定性定量结果更加可靠;
4、自动化程度高:液相与质谱连用,自动化操作,分析快,分离好。
1、细胞:5×106 个细胞;
2、动物组织:200mg;
3、植物组织:800mg;
4、微生物:400mg;
5、血清血浆:300ul。
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